传说，从耶稣在最后的晚餐中使用的圣杯中喝水会让你长生不老。一场淘金惊魂中，记录着圣杯的石碑诞生了，而圣杯的存在，或许会引来一大批疯狂的人打开寻找。印第安纳·琼斯博士（哈里森·福特饰）就是其中之一，甚至他的父亲老琼斯（肖恩·康纳利饰）也被卷入其中——但在他带着圣杯笔记离开琼斯后，他就消失了。踏上威尼斯大地，琼斯会见了提前约好的斯奈德博士（艾莉森·杜迪饰）。他们在图书馆里找到了带有线索的圣盾之后，就开始被十字剑莫名其妙地追杀了。几经周折，琼斯终于找到了老琼斯。与此同时，斯奈德的纳粹身份被曝光，纸条被带走。圣杯随时可能落入纳粹手中。于是，琼斯父子开始共同上演救灾圣杯的精彩大戏！
