拉里·戴利（本·斯蒂勒饰）的生活似乎并不顺利：他经常换工作，居无定所；他的妻子与他离婚，找了一个股票经纪人，准备再婚。也危在旦夕。为了保命和争取儿子的抚养权，达利不得不放弃“立大业”的梦想，成为纽约自然历史博物馆的夜班守卫。达利原本觉得这是一份枯燥的工作，但在上班的第一天，一件不可思议的事情发生了：博物馆里的法老金牌有神奇的魔力，一到晚上，博物馆里的所有标本就会活过来。过来吧，霸王龙追尸，爱惹事的猴子，强横的匈奴王，钻木取火的穴居人……让一切都无法交出。在第26任总统泰迪·罗斯福的帮助下，戴利终于控制住了局面。然而，他马上遇到了新的麻烦：有人想玩FarageGold的想法。职责，也为了博物馆之夜的奇观，大理不得不挺身而出。
